Technika PCR

[ Pobierz całość w formacie PDF ]
TECHNIKA PCR
Polimorfizm genu CD14 –
region promotorowy
Rys historyczny
• PCR jest jedną z najpotężniejszych technik
wykorzystywanych w biologii molekularnej
• Wymyślona i zaprojektowana przez Kary
Mullis’a w 1983, za co zresztą przyznano
nagrodę Nobla w dziedzinie chemii
nagrodę Nobla w dziedzinie chemii
• W skrócie można technikę tę nazwać
„kopiarką” dla DNA
Wykorzystanie techniki PCR
• Generuje bardzo dużą liczbę kopii specyficznych
fragmentów DNA, co przydatne jest np. w klonowaniu
• Przydatna w diagnostyce wielu chorób
• Wykorzystywana w celu potwierdzenia/ wykluczenia
ojcostwa
• Znajduje zastosowanie w kryminalistyce
• Znajduje zastosowanie w kryminalistyce
• Umożliwia sekwencjonowanie DNA
• Umożliwiła sklonowanie dinozaurów (JURASSIC PARK)
☺
• I wiele wiele innych….
PCR
Polymerase chain reaction
Łańcuchowa reakcja
polimerazy
polimerazy
Zasada działania
• Leży w lodówce polimeraza
Stara lecz mocna, enzym z żelaza
Leży i sapie, dyszy i dmucha,
Żar z aktywnego jej centrum bucha.
Leży zamknięta w swej ciemnej celi:
„Czy wszyscy o mnie już zapomnieli?
Od magistranta aż do docenta
nikt mnie już chyba tu nie pamięta !!"
I marzy biedna polimeraza
Wiele termostabilnych
polimeraz o aktywno
ś
ci
DNA polimerazy typu I,
izolowanych jest z
ekstremotermofili
nale
żą
cych do
ARCHEBACTERIA
(temp.
optymalna powy
ż
ej 80 ˚C)
izolowanych z dna
oceanów w pobli
ż
u
kominów geotermalnych
I marzy biedna polimeraza
Że ktoś ją bierze, w probówkę wsadza,
A w tej probówce oba startery,
Jakaś matrycka, zasady cztery
I bufor świeży, wonny jak wino....
Ech, by się enzym wtedy uwinął !!
Tak by popędził wzdłuż nici obu,
Tak z obu końców zadał im bobu,
Że nim by spostrzegł się zwierz czy
człek
Amplifikacji nadszedłby kres.
•
[ Pobierz całość w formacie PDF ]